Охлаждение спермы производится с помощью специальной аппаратуры. Для этого может быть использован универсальный охладитель программный КОП-6 и другие марки замораживателей биоматериалов.
Процесс криоконсервации требует, чтобы сперма была охлаждена до температуры - 196 градусов С т.е. температуры жидкого азота, который является лучшей средой для длительного хранения спермы. Соломки со спермой помещаются в горизонтальное положение в камеру охладителя. При замораживании сперма преодолевает два опасных температурных порога: около 0С и около - 20С. Поэтому для исключения вредного влияния температурных перепадов околонулевых температур, образцы спермы должны охлаждаться медленно, со скоростью 1 градус С в минуту. После достижения околонулевой температуры необходима экспозиция образца при данной температуре в течение 30-60 минут. Последнее условие необходимо для стабилизации подвижности сперматозоидов, что способствует повышению их криорезистентности.
Дальнейшее замораживание следует продолжать быстро - со скоростью не менее 20 градусов С в минуту до температуры около - 70 градусов С. После этого трубочки с образцами спермы должны быть перенесены в жидкий азот.

Другим методом криоконсервации спермы является метод криоконсервации с помощью сухого льда. Для данного метода не требуется сложного оборудования. После разжижения сперма смешивается в пробирке с криопротекторами в соотношении 1:1. Пробирка помещается в обычный холодильник на 2 часа. В течение этого времени происходит медленное падение температуры до + 4 градусов С.
В куске сухого льда формируются луночки диаметром около 1,0 см и глубиной до 0,5 см с помощью специальной формы, имеющей на поверхности выступы до 0,5 см и нагретой до температуры около 40 градусов С. В готовые лунки разливается охлажденная сперма. Затем замерзшие капли спермы переносятся (пересыпаются) в маркированные полимерные пробирки.
Показано, что хранение замороженных сперматозоидов более 36 месяцев приводит к снижению подвижности сперматозоидов. Однако зачатие и рождение детей наблюдалось при использовании сперматозоидов, хранившихся в замороженном состоянии до 9 лет.
Длительное время использование криоконсервированных сперматозоидов в процедуре ЭКО ограничивалось их параметрами после разморозки – подвижность не менее 10% клеток и концентрация не менее 10 млн/мл. С появлением технологий ИКСИ эти ограничения теряют значение.  

Показания к криоконсервации.

I. Кратковременная криоконсервация спермы.
•    Показана для накопления спермы при субфертильных ее показателях для последующего использования в программах внутриматочного оплодотворения или ЭКО.
•    Показана в случае отсутствия мужа в день проведении цикла вспомогательной репродуктивной программы.
II. Длительная криоконсервация спермы.

1.    Криоконсервация образцов, полученных при хирургических способах экстракции сперматозоидов из придатков или яичек избавляет пациентов от повторных операций по экстракции сперматозоидов, позволяет произвести больше попыток ЭКО или ИКСИ и предоставляет свободу в выборе времени проведения процедуры экстракорпорального оплодотворения.

2.   Криоконсервация сперматозоидов сохраняет возможность продолжения рода для молодых лиц со злокачественными заболеваниями, такими как рак яичка, болезнь Ходжкина, лейкозы, опухоли костной ткани, которым планируется лучевая и/или химиотерапия. Криоконсервация сперматозоидов полезна и при любых других заболеваниях, лечение которых может сказаться на качестве спермы, особенно когда речь идет о химиотерапии, лучевой терапии или гормонотерапии.


3.  Криоконсервация сперматозоидов может быть гарантом возможности репродукции в профессиях, связанных с высоким риском для репродуктивного здоровья: при работе в условиях контакта с органическими и неорганическими веществами, при работе в условиях высоких и низких температур, ионизирующего излучения, при экстремальных видах работ (автогонщики, испытатели, военнослужащие в период военных действий).

4.  Криоконсервация сперматозоидов показана в случае мужской стерилизации (вазэктомии) т.к потребность в восстановлении фертильности составляет 3-5% от числа стерилизованных. Стоит напомнить, что вазэктомия – инвазивное вмешательство, часто приводящее к необратимому бесплодию.

5. Криоконсервация сперматозоидов показана у пациентов с травмой спинного мозга или периферической полинейропатией у которых в 95% утрачивается способность к эякуляции. Электроэякуляция – психологически тягостная процедура, результаты которой можно и нужно использовать для криоконсервации для последующих программ экстракорпорального оплодотворения.

6.    Криоконсервация спермы доноров – это единственная возможность использования спермы доноров по действующим нормативным законодательным актам нашего государства. Донорскую сперму можно использовать только через шесть месяцев после ее забора, в течение которых проводится двукратное обследование донора спермы на наличие инфицированности вирусами иммунодефицита человека, гепатита В и С, обеспечивают защиту реципиента от передачи со спермой донора инфекций TORCH комплекса.
Накопление донорских сперматозоидов позволяет предоставить реципиентам больший выбор материала, различного по генотипу и фенотипу. Медицинское обследование доноров спермы проводится согласно рекомендациям Российской Ассоциации Репродукции Человека и Американского Общества Репродуктивной Медицины, включающим скрининг на различные инфекции, медико-генетическое обследование.